Functional microRNA screens in classic Hodgkin lymphoma: from surface marker regulation to brentuximab vedotin resistance
| Promotie: | Mw. P. (Penny) Pan |
| Wanneer: | 20 november 2024 |
| Aanvang: | 12:45 |
| Promotors: | prof. dr. J.H.M. (Anke) van den Berg, dr. A. (Arjan) Diepstra |
| Copromotor: | dr. J.L. (Joost) Kluiver |
| Waar: | Academiegebouw RUG |
| Faculteit: | Medische Wetenschappen / UMCG |
Functionele microRNA-screenings bij klassiek Hodgkin-lymfoom: van oppervlaktemarkerregulatie tot brentuximab vedotin-resistentie
Hodgkin lymfoom (cHL) is een B-cel maligniteit gekenmerkt door CD30 positieve Hodgkin-Reed/Sternberg (HRS) cellen. In dit proefschrift van Penny Pan is de rol van microRNAs (miRNAs) in de pathogenese en therapie respons op anti-CD30 brentuximab-vedotin (BV) behandeling onderzocht. Review van miRNA-gerelateerde studies resulteerde in een overzicht van bekende en potentieel relevante miRNA-target gen interacties, die het verdienen om aanvullend onderzocht te worden. In een miRNA overexpressie screening zijn 11 miRNA-target gen combinaties relevant voor de pathogenese van cHL en 66 miRNA constructen die een effect hebben op het effect van de BV behandeling geïdentificeerd. MiR-590 reguleerde de expressie van CD30 en induceerde resistentie tegen BV. MiR-191-5p induceerde BV-resistentie en verhoogde de celgroei. Door gebruik te maken van AGO2-immunoprecipitatie werd een netwerk van genen betrokken bij het miR-191 effect gevonden met een centrale rol voor PTEN.
Om het effect van endogene miRNAs op BV respons te bepalen zijn BV resistente cellijnen gemaakt. Deze cellijnen hadden onder druk van BV een verlaagde CD30 expressie. Daarnaast hebben we een CRISPR-Cas9 screen uitgevoerd om miRNAs te identificeren die betrokken zijn bij de regulatie van CD30 en bij het bepalen van de BV response. Hiervoor hebben we twee cas9-induceerbare cellijnen gemaakt en het screeningsprotocol voor cHL geoptimaliseerd. Data-analyse voor selectie van kandidaten is nog niet afgerond.
Samenvattend, in dit proefschrift is een overzicht gemaakt van relevante miRNA-target gen interacties, en is middels genoombrede screening strategiën additionele miRNA-target gen paren aangetoond. De resultaten onderstrepen het functionele belang van miRNAs in cHL.