Antagonistische RANKL varianten voor de behandeling van osteoporose

Het verliezen van botkwaliteit – of osteoporose – is een proces dat o.a. een rol speelt bij oudere vrouwen. In deze aandoening is de aanmaak en afbraak van bot door osteoblasten en osteoclasten uit balans geraakt. Osteoclasten breken bot af, terwijl de osteoblasten bot juist opbouwen.

Een cytokine als RANKL laat osteoclast precursor cellen tot osteoclasten differentiëren en stimuleert daarmee botafbraak. Het lijkt dus een aantrekkelijke strategie om dit proces te remmen in de strijd tegen osteoporose.

Er zijn met behulp van speciale software varianten van RANKL ontworpen met antagonistische werking d.w.z. dat ze de werking van het wild-type RANKL kunnen remmen. Deze eiwitvarianten zullen worden geproduceerd, gezuiverd en getest op binding aan de receptor RANK. Verder zal er met behulp van een weefselkweekproef aangetoond worden of deze varianten inderdaad in staat zijn de differentiatie van osteoclast precursor cellen naar geactiveerde osteoclasten tegen te gaan.

In het project ga je werken aan het produceren en karakteriseren van RANKL varianten.

De technieken die je zult leren en toepassen zijn onder andere:

• transformaties van bacteriën met plasmiden;
• productie van eiwitten in bacteriën;
• eiwitzuivering;
• eiwit-eiwit interactie (ELISA; surface plasmon resonance);
• weefselkweekproeven.

Referenties:

- Kim H, Choi HK, Shin JH, Kim KH, Huh JY, Lee SA, Ko CY, Kim HS, Shin HI, Lee HJ, Jeong D, Kim N, Choi Y, Lee SY. J Clin Invest. 2009 Apr;119(4):813-25. Selective inhibition of RANK blocks osteoclast maturation and function and prevents bone loss in mice.

- Aoki K, Saito H, Itzstein C, Ishiguro M, Shibata T, Blanque R, Mian AH, Takahashi M, Suzuki Y, Yoshimatsu M, Yamaguchi A, Deprez P, Mollat P, Murali R, Ohya K, Horne WC, Baron R. J Clin Invest. 2006 Jun;116(6): 1525-34. A TNF receptor loop peptide mimic blocks RANK ligand-induced signaling, bone resorption, and bone loss.

Voor meer informatie kun je contact opnemen met Dr. R.H. Cool, Basiseenheid Farmaceutische Biologie, GRIP, gebouw 3215 kamer 9.69, Antonius Deusinglaan 1, 9713 AV GRONINGEN.