Advanced insight on redox and lipid metabolism during the eukaryotic cell cycle
Geavanceerd inzicht in het redox- en lipidenmetabolisme tijdens de eukaryote celcyclus
Hanna Marije Terpstra: 'Onze onderzoeksgroep heeft eerder aangetoond dat in bakkersgist zowel lipidesynthese als de redoxbalans dynamisch zijn tijdens de celcyclus. In dit proefschrift hebben wij ons begrip van dynamisch lipidemetabolisme in de context van de celcyclus verder uitgediept. Allereerst hebben we, om de geautomatiseerde kwantificatie van vetdruppels mogelijk te maken, een algoritme voor automatische detectie van felle stippen ontwikkeld.
We hebben de functionaliteit van dit algoritme, dat vooral geschikt is om stippen te vinden in afbeeldingen met lagere resolutie en signaal-ruisverhouding, aangetoond aan de hand van vier verschillende toepassingen in bakkersgist. Vervolgens hebben we dit algoritme gebruikt om opslaglipidemetabolisme, gemeten via het aantal vetdruppels, te volgen gedurende de celcyclus. Zodoende hebben we ontdekt dat opslaglipidemetabolisme dynamisch is. We hebben ook uitgevonden dat de mobilisatie van opslaglipiden uit vetdruppels bijdraagt aan het tijdig plaatsvinden van START.
Ten slotte onderzochten we de celcyclusdynamiek van metabolisme in twee andere eukaryoten naast bakkersgist, namelijk splijtgist en leukemiecellen uit muizen. Gedurende de celcyclus hebben we NAD(P)H autofluorescentie en de groeisnelheid van het celoppervlak bepaald, om respectievelijk de cellulaire redoxbalans en lipidemetabolisme te volgen. Zodoende hebben we ontdekt dat, in alle drie de bestudeerde organismen, zowel de redoxbalans als lipidemetabolisme dynamisch zijn tijdens de celcyclus.
Samenvattend heeft dit proefschrift vooruitgang gebracht voor ons inzicht in dynamische redoxbalans en lipidemetabolisme tijdens de celcyclus door onze kennis uit te breiden van bakkersgist naar splijtgist en leukemiecellen uit muizen, en door te laten zien dat in bakkersgist naast lipidesynthese ook opslaglipidemetabolisme dynamisch is tijdens de celcyclus.'